青海發(fā)光桿菌成活率，判斷之形態(tài)學(xué)觀察法：

1、細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)顆?；蚩张?。

2、細(xì)胞內(nèi)如果出現(xiàn)顆粒物質(zhì)，表明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。

3、同樣，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡也說(shuō)明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。

 細(xì)胞喪失雙折射性：

    如果發(fā)生在單層細(xì)胞：一個(gè)具有雙折射性的正常細(xì)胞逐步失去這一特征（相差顯微鏡下細(xì)胞邊緣成暈環(huán)），則提示該細(xì)胞已經(jīng)死亡，即zui終干枯死亡。

    如果發(fā)生在懸浮細(xì)胞：正常懸浮細(xì)胞清晰透明，如胞內(nèi)出現(xiàn)顆?；蜃儨啙岜砻骷?xì)胞受損，甚至死亡。

    怎樣去除死細(xì)胞？單層培養(yǎng)的細(xì)胞死亡后，一般會(huì)漂浮起來(lái)，因此不需要特殊處理。

而懸浮細(xì)胞或原代培養(yǎng)細(xì)胞則要通過(guò)密度離心（如Ficoll梯度）方法收集死細(xì)胞。

細(xì)胞成活率檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

即刻檢測(cè)實(shí)驗(yàn)——

染料柜染實(shí)驗(yàn)：原理——萘黑、臺(tái)盼藍(lán)以及很多其他染料均不能透過(guò)活細(xì)胞。概要——將細(xì)胞懸液與染料混勻，在低倍顯微鏡下檢查。材料包括無(wú)菌材料,即細(xì)胞；生長(zhǎng)液；0.25%胰酶；PBSA.非滅菌材料即：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；生存力染料；巴斯德吸管；顯微鏡；手執(zhí)計(jì)數(shù)器。

操作步驟：

1、用胰蛋白酶消化或離心，重懸制備高深度的細(xì)胞懸液

2、取一塊干凈的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，將蓋玻片固定在適當(dāng)位置上。

3、將一<滴細(xì)胞懸液和一滴（臺(tái)盼藍(lán)）或四滴（萘黑）染料混勻/li>

4、加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室中。

5、靜置1~2min（但不要放置很久，否則活細(xì)胞會(huì)受到損傷而吸收染料）。

6、將計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下，用10倍物境找到計(jì)數(shù)網(wǎng)格。

7、青海發(fā)光桿菌計(jì)數(shù)細(xì)胞總及著色細(xì)胞的數(shù)目。

8、清洗血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，放入盒內(nèi)。
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青海發(fā)光桿菌