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    免疫熒光測定

    點(diǎn)擊次數(shù):1651次  更新時(shí)間:2015-06-30

        評(píng)估免疫熒光干式定量法檢測全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法150例住院患者,采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP,采用常規(guī)免疫比濁法檢測血清CRP,檢測結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。結(jié)果與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較,使用免疫熒光干式定量法檢測全血,兩種方法所得的CRP檢測結(jié)果相符,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP,具有快速、簡便、結(jié)果可靠等特點(diǎn),可作為臨床一種快速檢測感染過程和自身免疫疾病的工具。

        激光掃描共聚焦顯微鏡可以對(duì)經(jīng)過熒光標(biāo)記的組織標(biāo)本共聚焦熒光進(jìn)行定量分析.并顯示熒光沿Z軸的強(qiáng)度變化。它除了可以對(duì)單、雙或三重標(biāo)記的細(xì)胞及組織標(biāo)本的熒光進(jìn)行定量、定位分析外,還可以借助顯微CT功能在不損失分辨率的前提下對(duì)標(biāo)本深層進(jìn)行熒光分布的測量.獲得組織形態(tài)結(jié)構(gòu)信息。激光掃描共聚焦顯微鏡同樣適用于高靈敏度的快速免疫熒光測定,從而準(zhǔn)確檢測抗原表達(dá)、熒光原位雜交斑點(diǎn)及組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)特性,并作定量分析。
     
        先按照免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)進(jìn)行熒光染色,再用激光掃描共聚焦顯微鏡對(duì)其進(jìn)行定量和形態(tài)學(xué)分析。我國學(xué)者為確定某些物質(zhì)(如豬苓多糖)是否對(duì)培養(yǎng)的膀胱癌T!;:細(xì)胞抑癌基因p53和抑制細(xì)胞凋亡基因蛋白H-fas表達(dá)有調(diào)節(jié)作用,用激光掃描共聚焦顯微鏡對(duì)經(jīng)免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色的細(xì)胞進(jìn)行共聚焦熒光斷層掃描成像,每個(gè)細(xì)胞掃32個(gè)切面,用三維和定量軟件觀察與測定細(xì)胞內(nèi)熒光變化,細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí),對(duì)照組p53主要在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá),陽性信號(hào)呈黃綠色亮點(diǎn),點(diǎn)狀分布,呈現(xiàn)一核多點(diǎn)表達(dá),熒光強(qiáng)度較弱,為119±43。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞核內(nèi)強(qiáng)熒光,為170±13,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)也有強(qiáng)表達(dá),呈彌散性分布。對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的H-fas基因蛋白表達(dá)也作了同樣的檢測。通過對(duì)不同組培養(yǎng)細(xì)胞熒光強(qiáng)度的測定得出:豬苓多糖對(duì)膀胱癌T24 細(xì)胞p53基因蛋白表達(dá)有一定調(diào)節(jié)作用.對(duì)H-fas基因蛋白 表達(dá)無明顯影響(曾星等,2003)。近年來,應(yīng)用激光共聚焦掃描顯微鏡對(duì)腫瘤相關(guān)抗原等進(jìn)行定性定量研究的報(bào)道頗多,由此可見,激光掃描共聚焦顯微鏡在這一領(lǐng)域的應(yīng)用十分廣泛。

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